Die wydverspreide gebruik van sintetiese plaagdoders het gelei tot baie probleme, insluitend die opkoms van weerstandbiedende organismes, omgewingsagteruitgang en skade aan menslike gesondheid.Daarom is nuwe mikrobiese plaagdoders wat veilig is vir menslike gesondheid en die omgewing dringend nodig.In hierdie studie is rhamnolipied biosurfaktant geproduseer deur Enterobacter cloacae SJ2 gebruik om toksisiteit vir muskiet (Culex quinquefasciatus) en termiet (Odontotermes obesus) larwes te evalueer.Die resultate het getoon dat daar 'n dosisafhanklike sterftesyfer tussen behandelings was.Die LC50 (50% dodelike konsentrasie) waarde op 48 uur vir termiet- en muskietlarwes biosurfaktante is bepaal deur gebruik te maak van 'n nie-lineêre regressiekrommepassing metode.Die resultate het getoon dat die 48-uur LC50 waardes (95% vertrouensinterval) van larvicidale en antitermiet aktiwiteit van die biosurfaktant onderskeidelik 26,49 mg/L (reeks 25,40 tot 27,57) en 33,43 mg/L (reeks 31,069 tot 35) was.Volgens histopatologiese ondersoek het behandeling met biosurfaktante ernstige skade aan organelweefsels van larwes en termiete veroorsaak.Die resultate van hierdie studie dui aan dat die mikrobiese biosurfaktant wat deur Enterobacter cloacae SJ2 geproduseer word 'n uitstekende en potensieel effektiewe hulpmiddel vir Cx beheer is.quinquefasciatus en O. obesus.
Tropiese lande ervaar 'n groot aantal muskiet-oordraagbare siektes1.Die relevansie van muskietgedraagde siektes is wydverspreid.Meer as 400 000 mense sterf elke jaar aan malaria, en sommige groot stede ervaar epidemies van ernstige siektes soos dengue, geelkoors, chikungunya en Zika.2 Vektorgedraagde siektes word wêreldwyd met een uit ses infeksies geassosieer, met muskiete wat die meeste veroorsaak betekenisvolle gevalle3 ,4.Culex, Anopheles en Aedes is die drie muskietgenera wat die meeste met siekteoordrag geassosieer word5.Die voorkoms van dengue-koors, 'n infeksie wat deur die Aedes aegypti-muskiet oorgedra word, het die afgelope dekade toegeneem en hou 'n beduidende bedreiging vir openbare gesondheid in4,7,8.Volgens die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) loop meer as 40% van die wêreldbevolking die risiko van knokkelkoors, met 50–100 miljoen nuwe gevalle wat jaarliks in meer as 100 lande voorkom9,10,11.Dengue-koors het 'n groot openbare gesondheidsprobleem geword aangesien die voorkoms daarvan wêreldwyd toegeneem het12,13,14.Anopheles gambiae, algemeen bekend as die Afrika-Anopheles-muskiet, is die belangrikste vektor van menslike malaria in tropiese en subtropiese streke15.Wes-Nyl-virus, St. Louis-enkefalitis, Japannese enkefalitis en virale infeksies van perde en voëls word oorgedra deur Culex-muskiete, wat dikwels gewone huismuskiete genoem word.Daarbenewens is hulle ook draers van bakteriële en parasitiese siektes16.Daar is meer as 3 000 spesies termiete in die wêreld, en hulle bestaan al meer as 150 miljoen jaar17.Die meeste plae leef in die grond en voed op hout en houtprodukte wat sellulose bevat.Die Indiese termiet Odontotermes obesus is 'n belangrike plaag wat ernstige skade aan belangrike gewasse en plantasiebome aanrig18.In landbougebiede kan termietbesmettings in verskeie stadiums enorme ekonomiese skade aan verskeie gewasse, boomspesies en boumateriaal veroorsaak.Termiete kan ook menslike gesondheidsprobleme veroorsaak19.
Die kwessie van weerstand teen mikroörganismes en plae in vandag se farmaseutiese en landbougebiede is kompleks20,21.Daarom moet beide maatskappye soek na nuwe koste-effektiewe antimikrobiese middels en veilige bioplaagdoders.Sintetiese plaagdoders is nou beskikbaar en daar is getoon dat dit aansteeklik is en nie-teiken voordelige insekte afweer22.In onlangse jare het navorsing oor bio-oppervlakaktiewe middels uitgebrei as gevolg van hul toepassing in verskeie industrieë.Bio-oppervlakaktiewe middels is baie nuttig en noodsaaklik in landbou, grondremediëring, petroleumontginning, bakterieë en insekverwydering, en voedselverwerking23,24.Biosurfaktante of mikrobiese oppervlakaktiewe middels is bio-oppervlakaktiewe chemikalieë wat deur mikroörganismes soos bakterieë, giste en swamme in kushabitats en olie-besmette gebiede geproduseer word25,26.Chemies afgeleide oppervlakaktiewe middels en bio-oppervlakaktiewe middels is twee tipes wat direk uit die natuurlike omgewing verkry word27.Verskeie bio-oppervlakaktiewe middels word verkry uit mariene habitats28,29.Daarom is wetenskaplikes op soek na nuwe tegnologieë vir die vervaardiging van bio-oppervlakaktiewe middels gebaseer op natuurlike bakterieë30,31.Vooruitgang in sulke navorsing demonstreer die belangrikheid van hierdie biologiese verbindings vir omgewingsbeskerming32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium en hierdie bakteriese genera is goed bestudeerde verteenwoordigers23,33.
Daar is baie soorte bio-oppervlakaktiewe middels met 'n wye reeks toepassings34.'n Beduidende voordeel van hierdie verbindings is dat sommige van hulle antibakteriese, larvicidiese en insekdodende aktiwiteit het.Dit beteken dat hulle in die landbou-, chemiese, farmaseutiese en kosmetiese industrieë35,36,37,38 gebruik kan word.Omdat bio-oppervlakaktiewe middels oor die algemeen bioafbreekbaar en omgewingsgunstig is, word dit in geïntegreerde plaagbestuursprogramme gebruik om gewasse te beskerm39.Basiese kennis is dus verkry oor die larvicidale en antitermietaktiwiteit van mikrobiese bio-oppervlakaktiewe middels wat deur Enterobacter cloacae SJ2 geproduseer word.Ons het mortaliteit en histologiese veranderinge ondersoek wanneer dit aan verskillende konsentrasies van rhamnolipied biosurfaktante blootgestel is.Daarbenewens het ons die wyd gebruikte Quantitative Structure-Activity (QSAR) rekenaarprogram Ecological Structure-Activity (ECOSAR) geëvalueer om akute toksisiteit vir mikroalge, dafnia en visse te bepaal.
In hierdie studie is die antitermietaktiwiteit (toksisiteit) van gesuiwerde bio-oppervlakaktiewe middels by verskeie konsentrasies wat wissel van 30 tot 50 mg/ml (met 5 mg/ml intervalle) getoets teen Indiese termiete, O. obesus en vierde spesies ) Evalueer.Larwes van stadium Cx.Larwes van muskiete quinquefasciatus.Biosurfaktant LC50 konsentrasies oor 48 uur teen O. obesus en Cx.C. solanacearum.Muskietlarwes is geïdentifiseer deur gebruik te maak van 'n nie-lineêre regressiekrommepassing metode.Die resultate het getoon dat termietsterftes toegeneem het met toenemende bio-oppervlakaktiewe konsentrasie.Die resultate het getoon dat die biosurfaktant larvicidale aktiwiteit (Figuur 1) en anti-termietaktiwiteit (Figuur 2) gehad het, met 48-uur LC50 waardes (95% CI) van 26,49 mg/L (25,40 tot 27,57) en 33,43 mg/ l (Fig. 31.09 tot 35.68), onderskeidelik (Tabel 1).Wat akute toksisiteit (48 uur) betref, word die bio-oppervlakaktiewe middel as “skadelik” vir die getoetste organismes geklassifiseer.Die biosurfaktant wat in hierdie studie geproduseer is, het uitstekende larvicidale aktiwiteit getoon met 100% mortaliteit binne 24-48 uur na blootstelling.
Bereken die LC50-waarde vir larvicidale aktiwiteit.Nie-lineêre regressiekrommepassing (soliede lyn) en 95% vertrouensinterval (geskakeerde area) vir relatiewe mortaliteit (%).
Bereken die LC50-waarde vir anti-termietaktiwiteit.Nie-lineêre regressiekrommepassing (soliede lyn) en 95% vertrouensinterval (geskakeerde area) vir relatiewe mortaliteit (%).
Aan die einde van die eksperiment is morfologiese veranderinge en anomalieë onder die mikroskoop waargeneem.Morfologiese veranderinge is waargeneem in die kontrole en behandelde groepe by 40x vergroting.Soos getoon in Figuur 3, het groei inkorting plaasgevind in die meerderheid larwes wat met biosurfaktante behandel is.Figuur 3a toon 'n normale Cx.quinquefasciatus, Figuur 3b toon 'n anomale Cx.Veroorsaak vyf nematode larwes.
Effek van subletale (LC50) dosisse biosurfaktante op die ontwikkeling van Culex quinquefasciatus larwes.Ligmikroskopiebeeld (a) van 'n normale Cx by 40× vergroting.quinquefasciatus (b) Abnormale Cx.Veroorsaak vyf nematode larwes.
In die huidige studie het histologiese ondersoek van behandelde larwes (Fig. 4) en termiete (Fig. 5) verskeie abnormaliteite aan die lig gebring, insluitend vermindering in abdominale area en skade aan spiere, epiteellae en vel.middelderm.Histologie het die meganisme van inhiberende aktiwiteit van die biosurfaktant wat in hierdie studie gebruik is, aan die lig gebring.
Histopatologie van normale onbehandelde 4de stadium Cx larwes.quinquefasciatus larwes (kontrole: (a,b)) en behandel word met biosurfaktant (behandeling: (c,d)).Pyle dui behandelde derm-epiteel (epi), kerne (n) en spier (mu) aan.Staaf = 50 µm.
Histopatologie van normale onbehandelde O. obesus (kontrole: (a,b)) en biosurfaktant behandel (behandeling: (c,d)).Pyle dui onderskeidelik intestinale epiteel (epi) en spier (mu) aan.Staaf = 50 µm.
In hierdie studie is ECOSAR gebruik om die akute toksisiteit van rhamnolipied bio-oppervlakaktiewe produkte vir primêre produsente (groen alge), primêre verbruikers (watervlooie) en sekondêre verbruikers (vis) te voorspel.Hierdie program gebruik gesofistikeerde kwantitatiewe struktuur-aktiwiteit verbinding modelle om toksisiteit te evalueer gebaseer op molekulêre struktuur.Die model gebruik struktuuraktiwiteit (SAR) sagteware om die akute en langtermyn toksisiteit van stowwe vir akwatiese spesies te bereken.Spesifiek, Tabel 2 som die beraamde gemiddelde dodelike konsentrasies (LC50) en gemiddelde effektiewe konsentrasies (EC50) vir verskeie spesies op.Vermeende toksisiteit is in vier vlakke gekategoriseer deur gebruik te maak van die Globally Geharmoniseerde Stelsel van Klassifikasie en Etikettering van Chemikalieë (Tabel 3).
Beheer van vektoroordraagbare siektes, veral stamme van muskiete en Aedes muskiete.Egiptenare, nou moeilike werk 40,41,42,43,44,45,46.Alhoewel sommige chemies beskikbare plaagdoders, soos piretroïede en organofosfate, ietwat voordelig is, hou dit aansienlike risiko's vir menslike gesondheid in, insluitend diabetes, voortplantingsafwykings, neurologiese afwykings, kanker en respiratoriese siektes.Boonop kan hierdie insekte mettertyd weerstand teen hulle word13,43,48.Dus sal effektiewe en omgewingsvriendelike biologiese beheermaatreëls 'n meer gewilde metode van muskietbeheer word49,50.Benelli51 het voorgestel dat vroeë beheer van muskietvektore meer effektief in stedelike gebiede sou wees, maar hulle het nie die gebruik van larvicdoders in landelike gebiede aanbeveel nie52.Tom et al 53 het ook voorgestel dat die beheer van muskiete in hul onvolwasse stadiums 'n veilige en eenvoudige strategie sou wees omdat hulle meer sensitief is vir beheermiddels 54 .
Biosurfaktant produksie deur 'n kragtige stam (Enterobacter cloacae SJ2) het konsekwente en belowende doeltreffendheid getoon.Ons vorige studie het gerapporteer dat Enterobacter cloacae SJ2 die produksie van bio-oppervlakaktiewe middels optimaliseer deur gebruik te maak van fisies-chemiese parameters26.Volgens hul studie was die optimale toestande vir bio-oppervlakaktiewe produksie deur 'n potensiële E. cloacae isolaat inkubasie vir 36 uur, roering by 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, soutgehalte 1 ppt, 2% glukose as koolstofbron, 1 % gis .die ekstrak is as 'n stikstofbron gebruik om 2.61 g/L bio-oppervlakaktiewe middel te verkry.Daarbenewens is die bio-oppervlakaktiewe middels gekarakteriseer deur gebruik te maak van TLC, FTIR en MALDI-TOF-MS.Dit het bevestig dat rhamnolipied 'n biosurfaktant is.Glikolipiede biosurfaktante is die klas van ander tipes biosurfaktante wat die mees intensief bestudeer is55.Hulle bestaan uit koolhidraat- en lipieddele, hoofsaaklik vetsuurkettings.Onder glikolipiede is die hoofverteenwoordigers rhamnolipied en sophorolipid56.Ramnolipiede bevat twee rhamnose-eenhede gekoppel aan mono- of di-β-hidroksiedkaansuur 57.Die gebruik van ramnolipiede in die mediese en farmaseutiese industrieë is goed gevestig 58 , benewens hul onlangse gebruik as plaagdoders 59 .
Die interaksie van die bio-oppervlakaktiewe middel met die hidrofobiese gebied van die respiratoriese sifon laat water deur sy stomatale holte beweeg, waardeur die kontak van die larwes met die akwatiese omgewing verhoog word.Die teenwoordigheid van biosurfaktante beïnvloed ook die tragea, waarvan die lengte naby die oppervlak is, wat dit makliker maak vir die larwes om na die oppervlak te kruip en asem te haal.As gevolg hiervan neem die oppervlakspanning van water af.Aangesien die larwes nie aan die oppervlak van die water kan heg nie, val hulle na die bodem van die tenk, wat hidrostatiese druk ontwrig, wat lei tot oormatige energieverbruik en dood deur verdrinking38,60.Soortgelyke resultate is verkry deur Ghribi61, waar 'n biosurfaktant geproduseer deur Bacillus subtilis larvicidale aktiwiteit teen Ephestia kuehniella getoon het.Net so, die larvicidale aktiwiteit van Cx.Das en Mukherjee23 het ook die effek van sikliese lipopeptied op quinquefasciatus-larwes beoordeel.
Die resultate van hierdie studie handel oor die larvicidale aktiwiteit van rhamnolipied biosurfaktante teen Cx.Die doodmaak van quinquefasciatus-muskiete stem ooreen met voorheen gepubliseerde resultate.Byvoorbeeld, surfaktien-gebaseerde biosurfaktante wat deur verskeie bakterieë van die genus Bacillus geproduseer word, word gebruik.en Pseudomonas spp.Sommige vroeë verslae64,65,66 het larwe-dodende aktiwiteit van lipopeptied biosurfaktante van Bacillus subtilis23 gerapporteer.Deepali et al.63 het gevind dat rhamnolipied biosurfaktant geïsoleer vanaf Stenotropomonas maltophilia kragtige larvicidale aktiwiteit het by 'n konsentrasie van 10 mg/L.Silva et al.67 het die larvicidale aktiwiteit van rhamnolipied biosurfaktant teen Ae by 'n konsentrasie van 1 g/L gerapporteer.Aedes aegypti.Kanakdande et al.68 het gerapporteer dat lipopeptied biosurfaktante geproduseer deur Bacillus subtilis algehele mortaliteit in Culex larwes en termiete veroorsaak het met die lipofiele fraksie van Eucalyptus.Net so het Masendra et al.69 gerapporteer werkermier (Cryptotermes cynocephalus Light.) mortaliteit van 61.7% in die lipofiele n-heksaan en EtOAc fraksies van E. ru-ekstrak.
Parthipan et al 70 het die insekdodende gebruik van lipopeptied biosurfaktante geproduseer deur Bacillus subtilis A1 en Pseudomonas stutzeri NA3 teen Anopheles Stephensi, 'n vektor van die malariaparasiet Plasmodium, gerapporteer.Hulle het waargeneem dat larwes en papies langer oorleef het, korter oviposisieperiodes gehad het, steriel was en korter lewensduur gehad het wanneer hulle met verskillende konsentrasies bio-oppervlakaktiewe behandel is.Die waargenome LC50-waardes van B. subtilis biosurfaktant A1 was onderskeidelik 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 en 7.99 mg/L vir verskillende larwestoestande (dws larwes I, II, III, IV en stadiumpapies).Ter vergelyking was biosurfaktante vir larwestadiums I-IV en papiestadiums van Pseudomonas stutzeri NA3 onderskeidelik 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 en 6.99 mg/L.Die vertraagde fenologie van oorlewende larwes en papies is vermoedelik die gevolg van beduidende fisiologiese en metaboliese versteurings wat deur insekdoderbehandelings veroorsaak word71.
Wickerhamomyces anomalus-stam CCMA 0358 produseer 'n bio-oppervlakaktiewe middel met 100% larvicidale aktiwiteit teen Aedes-muskiete.aegypti 24-uur interval 38 was hoër as gerapporteer deur Silva et al.'n Biosurfaktant wat van Pseudomonas aeruginosa vervaardig word deur sonneblomolie as 'n koolstofbron te gebruik, is getoon om 100% van larwes binne 48 uur dood te maak 67 .Abinaya et al.72 en Pradhan et al.73 het ook die larvic- of insekdodende effekte van oppervlakaktiewe middels geproduseer deur verskeie isolate van die genus Bacillus getoon.’n Voorheen gepubliseerde studie deur Senthil-Nathan et al.gevind dat 100% van muskietlarwes wat aan plantstrandmere blootgestel is, waarskynlik sal sterf.74.
Die beoordeling van die subdodelike effekte van insekdoders op insekbiologie is van kritieke belang vir geïntegreerde plaagbestuursprogramme omdat subletale dosisse/konsentrasies nie insekte doodmaak nie, maar insekbevolkings in toekomstige generasies kan verminder deur biologiese eienskappe te ontwrig10.Siqueira et al 75 het volledige larvicidale aktiwiteit (100% mortaliteit) van rhamnolipied biosurfaktant (300 mg/ml) waargeneem wanneer dit getoets is teen verskeie konsentrasies wat wissel van 50 tot 300 mg/ml.Larwale stadium van Aedes aegypti-stamme.Hulle het die uitwerking van tyd tot dood en subdodelike konsentrasies op larwe-oorlewing en swemaktiwiteit ontleed.Daarbenewens het hulle 'n afname in swemspoed waargeneem na 24-48 uur se blootstelling aan subletale konsentrasies van bio-oppervlakaktiewe middel (bv. 50 mg/ml en 100 mg/ml).Gifstowwe wat belowende subdodelike rolle het, word vermoedelik meer effektief te wees om veelvuldige skade aan blootgestelde plae te veroorsaak76.
Histologiese waarnemings van ons resultate dui daarop dat biosurfaktante geproduseer deur Enterobacter cloacae SJ2 die weefsels van muskiet (Cx. quinquefasciatus) en termiet (O. obesus) larwes aansienlik verander.Soortgelyke anomalieë is veroorsaak deur preparate van basiliekruidolie in An.gambiaes.s en An.arabica is deur Ochola77 beskryf.Kamaraj et al.78 het ook dieselfde morfologiese abnormaliteite in An beskryf.Stephanie se larwes is aan goue nanopartikels blootgestel.Vasantha-Srinivasan et al.79 het ook berig dat herdersbeurs essensiële olie die kamer- en epiteellae van Aedes albopictus ernstig beskadig het.Aedes aegypti.Raghavendran et al het gerapporteer dat muskietlarwes met 500 mg/ml miseliumekstrak van 'n plaaslike Penicillium-swam behandel is.Ae toon ernstige histologiese skade.aegypti en Cx.Sterftesyfer 80. Voorheen het Abinaya et al.Vierde stadium larwes van An is bestudeer.Stephensi en Ae.aegypti het talle histologiese veranderinge gevind in Aedes aegypti behandel met B. licheniformis eksopolisakkariede, insluitend maag blindedarm, spieratrofie, skade en disorganisasie van senuwee koord ganglia72.Volgens Raghavendran et al. het die middeldermselle van getoetste muskiete (4de stadium larwes) na behandeling met P. daleae miseliumekstrak swelling van die dermlumen, 'n afname in intersellulêre inhoud en kerndegenerasie getoon81.Dieselfde histologiese veranderinge is waargeneem in muskietlarwes wat met echinacea blaarekstrak behandel is, wat die insekdodende potensiaal van die behandelde verbindings aandui50.
Die gebruik van ECOSAR-sagteware het internasionale erkenning gekry82.Huidige navorsing dui daarop dat die akute toksisiteit van ECOSAR bio-oppervlakaktiewe middels vir mikroalge (C. vulgaris), visse en watervlooie (D. magna) binne die “toksisiteit”-kategorie val wat deur die Verenigde Nasies gedefinieer is83.Die ECOSAR-ekotoksisiteitsmodel gebruik SAR en QSAR om akute en langtermyn toksisiteit van stowwe te voorspel en word dikwels gebruik om die toksisiteit van organiese besoedelingstowwe te voorspel82,84.
Paraformaldehied, natriumfosfaatbuffer (pH 7.4) en alle ander chemikalieë wat in hierdie studie gebruik is, is by HiMedia Laboratories, Indië, gekoop.
Biosurfaktant-produksie is uitgevoer in 500 ml Erlenmeyer-flesse wat 200 ml steriele Bushnell Haas-medium bevat, aangevul met 1% ru-olie as die enigste koolstofbron.'n Voorkultuur van Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) is geënt en gekweek op 'n orbitale skudder by 37°C, 200 rpm vir 7 dae.Na afloop van die inkubasieperiode is die biosurfaktant onttrek deur die kweekmedium te sentrifugeer by 3400×g vir 20 minute by 4°C en die resulterende supernatant is vir siftingsdoeleindes gebruik.Die optimaliseringsprosedures en karakterisering van bio-oppervlakaktiewe middels is oorgeneem uit ons vroeëre studie26.
Culex quinquefasciatus-larwes is verkry vanaf die Sentrum vir Gevorderde Studie in Mariene Biologie (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (Indië).Larwes is grootgemaak in plastiekhouers gevul met gedeïoniseerde water by 27 ± 2°C en 'n fotoperiode van 12:12 (lig:donker).Muskietlarwes is met 'n 10% glukose-oplossing gevoer.
Culex quinquefasciatus-larwes is in oop en onbeskermde septiese tenks gevind.Gebruik standaard klassifikasieriglyne om larwes in die laboratorium te identifiseer en te kweek85.Larvisdodende proewe is uitgevoer in ooreenstemming met die aanbevelings van die Wêreldgesondheidsorganisasie 86 .SH.Vierde stadium larwes van quinquefasciatus is in geslote buise versamel in groepe van 25 ml en 50 ml met 'n lugspleet van twee derdes van hul kapasiteit.Biosurfaktant (0-50 mg/ml) is individueel by elke buis gevoeg en by 25 °C gestoor.Die kontrolebuis het slegs gedistilleerde water (50 ml) gebruik.Dooie larwes is beskou as dié wat geen tekens van swem tydens die inkubasietydperk (12-48 uur) 87 getoon het nie.Bereken die persentasie larfsterftes deur die vergelyking te gebruik.(1)88.
Die familie Odontotermitidae sluit die Indiese termiet Odontotermes obesus in, wat in verrottende stompe by die Landboukampus (Annamalai Universiteit, Indië) gevind word.Toets hierdie bio-oppervlakaktiewe middel (0–50 mg/ml) met normale prosedures om te bepaal of dit skadelik is.Na droging in laminêre lugvloei vir 30 minute, is elke strook Whatman-papier bedek met 'n biosurfaktant by 'n konsentrasie van 30, 40 of 50 mg/ml.Voorafbedekte en onbedekte papierstroke is in die middel van 'n Petri-bak getoets en vergelyk.Elke petriskottel bevat ongeveer dertig aktiewe termiete O. obesus.Beheer- en toetstermiete is nat papier as voedselbron gegee.Alle plate is regdeur die inkubasietydperk by kamertemperatuur gehou.Termiete het na 12, 24, 36 en 48 uur gesterf89,90.Vergelyking 1 is dan gebruik om die persentasie termietsterftes by verskillende bio-oppervlakaktiewe konsentrasies te skat.(2).
Die monsters is op ys gehou en in mikrobuise verpak wat 100 ml 0.1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7.4) bevat en na die Sentrale Akwakultuurpatologielaboratorium (CAPL) van die Rajiv Gandhi Sentrum vir Akwakultuur (RGCA) gestuur.Histologielaboratorium, Sirkali, Mayiladuthurai.Distrik, Tamil Nadu, Indië vir verdere ontleding.Monsters is onmiddellik gefixeer in 4% paraformaldehied by 37°C vir 48 uur.
Na die fiksasiefase is die materiaal drie keer gewas met 0.1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7.4), stapsgewys in etanol gedehidreer en vir 7 dae in LEICA hars geweek.Die stof word dan in 'n plastiekvorm geplaas wat met hars en polimeriseerder gevul is, en dan in 'n oond geplaas wat tot 37°C verhit is totdat die blok wat die stof bevat, heeltemal gepolimeriseer is.
Na polimerisasie is die blokke gesny met behulp van 'n LEICA RM2235 mikrotoom (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, VSA) tot 'n dikte van 3 mm.Die afdelings is op skyfies gegroepeer, met ses afdelings per skyfie.Die skyfies is by kamertemperatuur gedroog, dan gekleur met hematoksilien vir 7 min en gewas met lopende water vir 4 min.Dien ook die eosienoplossing vir 5 minute op die vel toe en spoel met lopende water vir 5 minute.
Akute toksisiteit is voorspel deur waterorganismes van verskillende tropiese vlakke te gebruik: 96-uur vis LC50, 48-uur D. magna LC50, en 96-uur groen alge EC50.Die toksisiteit van rhamnolipied bio-oppervlakaktiewe middels vir visse en groen alge is geassesseer met behulp van ECOSAR sagteware weergawe 2.2 vir Windows ontwikkel deur die Amerikaanse Omgewingsbeskermingsagentskap.(Aanlyn beskikbaar by https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Alle toetse vir larvicidale en antitermietaktiwiteit is in drievoud uitgevoer.Nie-lineêre regressie (log van dosisresponsveranderlikes) van larwe- en termietsterftedata is uitgevoer om mediaan dodelike konsentrasie (LC50) met 95% vertrouensinterval te bereken, en konsentrasie-responskrommes is gegenereer met behulp van Prism® (weergawe 8.0, GraphPad Software) Inc., VSA) 84, 91.
Die huidige studie onthul die potensiaal van mikrobiese biosurfaktante wat deur Enterobacter cloacae SJ2 geproduseer word as muskiet-larviese en antitermietmiddels, en hierdie werk sal bydra tot 'n beter begrip van die meganismes van larvicidale en antitermietwerking.Histologiese studies van larwes wat met biosurfaktante behandel is, het skade aan die spysverteringskanaal, middelderm, serebrale korteks en hiperplasie van derm-epiteelselle getoon.Resultate: Toksikologiese evaluasie van die antitermiet- en larvicidale aktiwiteit van rhamnolipied-biosurfaktant wat deur Enterobacter cloacae SJ2 geproduseer word, het aan die lig gebring dat hierdie isolaat 'n potensiële bio-plaagdoder is vir die beheer van vektor-gedraagde siektes van muskiete (Cx quinquefasciatus) en termiete.Daar is 'n behoefte om die onderliggende omgewingstoksisiteit van bio-oppervlakaktiewe middels en hul potensiële omgewingsimpakte te verstaan.Hierdie studie verskaf 'n wetenskaplike basis vir die beoordeling van die omgewingsrisiko van bio-oppervlakaktiewe middels.
Postyd: Apr-09-2024