navraagbg

Die sinergistiese effek van essensiële olies op volwassenes verhoog die toksisiteit van permetrien teen Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) |

In 'n vorige projek wat plaaslike voedselverwerkingsaanlegte vir muskiete in Thailand getoets het, is gevind dat die essensiële olies (EO's) van Cyperus rotundus, galangal en kaneel goeie anti-muskiet aktiwiteit teen Aedes aegypti het. In 'n poging om die gebruik van tradisionele ... te verminderinsekdodersen die beheer van weerstandige muskietpopulasies te verbeter, het hierdie studie ten doel gehad om die potensiële sinergisme tussen die volwassedodende effekte van etileenoksied en die toksisiteit van permetrien vir Aedes-muskiete aegypti, insluitend piretroïed-weerstandige en sensitiewe stamme, te identifiseer.
Om die chemiese samestelling en dodende aktiwiteit van EO wat uit die risome van C. rotundus en A. galanga en die bas van C. verum teen die vatbare stam Muang Chiang Mai (MCM-S) en die weerstandige stam Pang Mai Dang (PMD-R) onttrek is, te evalueer. ) Volwasse aktiewe Ae. Aedes aegypti. 'n Volwasse bio-assay van die EO-permetrienmengsel is ook op hierdie Aedes-muskiete uitgevoer om die sinergistiese aktiwiteit daarvan te verstaan. aegypti-stamme.
Chemiese karakterisering met behulp van die GC-MS analitiese metode het getoon dat 48 verbindings geïdentifiseer is uit die EO's van C. rotundus, A. galanga en C. verum, wat onderskeidelik 80.22%, 86.75% en 97.24% van die totale komponente uitmaak. Sipereen (14.04%), β-bisaboleen (18.27%), en cinnamaldehied (64.66%) is die hoofkomponente van onderskeidelik siperusolie, galangalolie en balsamiese olie. In biologiese volwasse doodmaaktoetse was C. rotundus, A. galanga en C. verum EV's effektief in die doodmaak van Ae. aegypti. MCM-S en PMD-R LD50-waardes was onderskeidelik 10.05 en 9.57 μg/mg wyfie, 7.97 en 7.94 μg/mg wyfie, en 3.30 en 3.22 μg/mg wyfie. Die doeltreffendheid van MCM-S en PMD-R Ae in die doodmaak van volwassenes. aegypti in hierdie EO's was naby aan piperonielbutoksied (PBO-waardes, LD50 = onderskeidelik 6.30 en 4.79 μg/mg wyfies), maar nie so prominent soos permetrien nie (LD50-waardes = onderskeidelik 0.44 en 3.70 ng/mg wyfies). Kombinasie-bioassays het egter sinergie tussen EO en permetrien gevind. Beduidende sinergisme met permetrien teen twee stamme van Aedes-muskiete. Aedes aegypti is opgemerk in die EM van C. rotundus en A. galanga. Die byvoeging van C. rotundus- en A. galanga-olies het die LD50-waardes van permetrien op MCM-S aansienlik verminder van 0.44 tot 0.07 ng/mg en 0.11 ng/mg in wyfies, onderskeidelik, met sinergieverhouding (SR)-waardes van onderskeidelik 6.28 en 4.00. Daarbenewens het C. rotundus en A. galanga EO's ook die LD50-waardes van permetrien op PMD-R aansienlik verminder van 3.70 tot 0.42 ng/mg en 0.003 ng/mg in wyfies, onderskeidelik, met SR-waardes van onderskeidelik 8.81 en 1233.33.
Sinergistiese effek van 'n EO-permetrien-kombinasie om volwasse toksisiteit teen twee stamme van Aedes-muskiete te verhoog. Aedes aegypti toon 'n belowende rol vir etileenoksied as 'n sinergis in die verbetering van anti-muskiet-effektiwiteit, veral waar tradisionele verbindings ondoeltreffend of onvanpas is.
Die Aedes aegypti-muskiet (Diptera: Culicidae) is die hoofvektor van dengue-koors en ander aansteeklike virussiektes soos geelkoors, chikungunya en Zika-virus, wat 'n groot en volgehoue ​​bedreiging vir mense inhou [1, 2]. Dengue-virus is die ernstigste patogene hemorragiese koors wat mense affekteer, met 'n geraamde 5-100 miljoen gevalle wat jaarliks ​​voorkom en meer as 2,5 miljard mense wêreldwyd in gevaar stel [3]. Uitbrake van hierdie aansteeklike siekte plaas 'n groot las op die bevolkings, gesondheidstelsels en ekonomieë van die meeste tropiese lande [1]. Volgens die Thaise Ministerie van Gesondheid was daar 142 925 gevalle van dengue-koors en 141 sterftes wat landwyd in 2015 aangemeld is, meer as drie keer die aantal gevalle en sterftes in 2014 [4]. Ten spyte van historiese bewyse, is dengue-koors uitgeroei of aansienlik verminder deur die Aedes-muskiet. Na die beheer van Aedes aegypti [5] het infeksiesyfers dramaties toegeneem en die siekte het wêreldwyd versprei, deels as gevolg van dekades van aardverwarming. Die uitwissing en beheer van Aedes aegypti is relatief moeilik omdat dit 'n huishoudelike muskietvektor is wat gedurende die dag in en om menslike bewoning paar, voed, rus en eiers lê. Boonop het hierdie muskiet die vermoë om aan te pas by omgewingsveranderinge of steurnisse wat veroorsaak word deur natuurlike gebeurtenisse (soos droogte) of menslike beheermaatreëls, en kan na sy oorspronklike getalle terugkeer [6, 7]. Omdat entstowwe teen denguekoors eers onlangs goedgekeur is en daar geen spesifieke behandeling vir denguekoors is nie, hang die voorkoming en vermindering van die risiko van dengue-oordrag geheel en al af van die beheer van die muskietvektore en die uitskakeling van menslike kontak met die vektore.
In die besonder speel die gebruik van chemikalieë vir muskietbeheer nou 'n belangrike rol in openbare gesondheid as 'n belangrike komponent van omvattende geïntegreerde vektorbestuur. Die gewildste chemiese metodes sluit in die gebruik van lae-toksiese insekdoders wat teen muskietlarwes (larvisiede) en volwasse muskiete (adidosiede) werk. Larwale beheer deur bronvermindering en gereelde gebruik van chemiese larvisiede soos organofosfate en insekgroeireguleerders word as belangrik beskou. Die nadelige omgewingsimpakte wat verband hou met sintetiese plaagdoders en hul arbeidsintensiewe en komplekse onderhoud bly egter 'n groot bron van kommer [8, 9]. Tradisionele aktiewe vektorbeheer, soos volwasse beheer, bly die mees effektiewe manier van beheer tydens virusuitbrake omdat dit aansteeklike siektevektore vinnig en op groot skaal kan uitroei, asook die lewensduur en lang lewe van plaaslike vektorpopulasies kan verminder [3], 10]. Vier klasse chemiese insekdoders: organochloore (slegs na verwys as DDT), organofosfate, karbamate en piretroïede vorm die basis van vektorbeheerprogramme, met piretroïede wat as die suksesvolste klas beskou word. Hulle is hoogs effektief teen verskeie geleedpotiges en het lae effektiwiteit. toksisiteit vir soogdiere. Tans maak sintetiese piretroïede die meerderheid kommersiële plaagdoders uit, wat ongeveer 25% van die wêreldwye plaagdodermark uitmaak [11, 12]. Permetrien en deltametrien is breëspektrum-piretroïed-insekdoders wat al dekades lank wêreldwyd gebruik word om 'n verskeidenheid plae van landbou- en mediese belang te beheer [13, 14]. In die 1950's is DDT gekies as die chemikalie van keuse vir Thailand se nasionale openbare gesondheidsprogram vir muskietbeheer. Na aanleiding van die wydverspreide gebruik van DDT in malaria-endemiese gebiede, het Thailand die gebruik van DDT geleidelik tussen 1995 en 2000 uitgefaseer en dit vervang met twee piretroïede: permetrien en deltametrien [15, 16]. Hierdie piretroïed-insekdoders is in die vroeë 1990's bekendgestel om malaria en dengue-koors te beheer, hoofsaaklik deur middel van bednetbehandelings en die gebruik van termiese mis en ultra-lae toksisiteitsspuitmiddels [14, 17]. Hulle het egter doeltreffendheid verloor as gevolg van sterk muskietweerstand en 'n gebrek aan openbare nakoming as gevolg van kommer oor openbare gesondheid en die omgewingsimpak van sintetiese chemikalieë. Dit hou beduidende uitdagings in vir die sukses van bedreigingsvektorbeheerprogramme [14, 18, 19]. Om die strategie meer effektief te maak, is tydige en gepaste teenmaatreëls nodig. Aanbevole bestuursprosedures sluit in die vervanging van natuurlike stowwe, rotasie van chemikalieë van verskillende klasse, byvoeging van sinergiste, en die vermenging van chemikalieë of gelyktydige toediening van chemikalieë van verskillende klasse [14, 20, 21]. Daarom is daar 'n dringende behoefte om 'n omgewingsvriendelike, gerieflike en effektiewe alternatief en sinergis te vind en te ontwikkel, en hierdie studie poog om hierdie behoefte aan te spreek.
Natuurlik afgeleide insekdoders, veral dié gebaseer op plantkomponente, het potensiaal getoon in die evaluering van huidige en toekomstige muskietbeheeralternatiewe [22, 23, 24]. Verskeie studies het getoon dat dit moontlik is om belangrike muskietvektore te beheer deur plantprodukte, veral essensiële olies (EO's), as volwasse moordenaars te gebruik. Volwassendodende eienskappe teen sommige belangrike muskietspesies is gevind in baie plantaardige olies soos seldery, komyn, zedoaria, anys, pypeper, tiemie, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata en Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30]. Etileenoksied word nou nie net op sy eie gebruik nie, maar ook in kombinasie met geëkstraheerde plantstowwe of bestaande sintetiese plaagdoders, wat wisselende grade van toksisiteit veroorsaak. Kombinasies van tradisionele insekdoders soos organofosfate, karbamate en piretroïede met etileenoksied/plantekstrakte werk sinergisties of antagonisties in hul toksiese effekte en is bewys effektief te wees teen siektevektore en plae [31,32,33,34,35]. Die meeste studies oor die sinergistiese toksiese effekte van kombinasies van fitochemikalieë met of sonder sintetiese chemikalieë is egter op landbou-insekvektore en -plae uitgevoer eerder as op medies belangrike muskiete. Boonop het die meeste van die werk oor die sinergistiese effekte van plant-sintetiese insekdoderkombinasies teen muskietvektore op die larvisidiese effek gefokus.
In 'n vorige studie wat deur die outeurs uitgevoer is as deel van 'n voortgesette navorsingsprojek wat intimideerders van inheemse voedselplante in Thailand ondersoek het, is bevind dat etileenoksiede van Cyperus rotundus, galangal en kaneel potensiële aktiwiteit teen volwasse Aedes-muskiete in Egipte het [36]. Daarom was hierdie studie daarop gemik om die doeltreffendheid van EO's wat uit hierdie medisinale plante geïsoleer is, teen Aedes-muskiete in Egipte te evalueer, insluitend piretroïed-bestande en sensitiewe stamme. Die sinergistiese effek van binêre mengsels van etileenoksied en sintetiese piretroïede met goeie doeltreffendheid by volwassenes is ook geanaliseer om die gebruik van tradisionele insekdoders te verminder en weerstand teen muskietvektore te verhoog, veral teen Aedes-muskiete in piretroïed-sensitiewe stamme (MCM-S) en weerstandige stamme (PMD-R). Hierdie artikel rapporteer die chemiese karakterisering van effektiewe essensiële olies en hul potensiaal om die toksisiteit van sintetiese permetrien teen Aedes-muskiete in piretroïed-sensitiewe stamme (MCM-S) en weerstandige stamme (PMD-R) te verhoog.
Risome van C. rotundus en A. galanga en bas van C. verum (Fig. 1) wat vir essensiële olie-ekstraksie gebruik word, is aangekoop van kruiemedisyneverskaffers in Chiang Mai-provinsie, Thailand. Die wetenskaplike identifikasie van hierdie plante is bereik deur konsultasie met mnr. James Franklin Maxwell, Herbarium-botanis, Departement Biologie, Kollege vir Wetenskap, Chiang Mai Universiteit (CMU), Chiang Mai-provinsie, Thailand, en wetenskaplike Wannari Charoensap; in die Departement Farmasie, Kollege vir Farmasie, Carnegie Mellon Universiteit, word mev. Voucher-monsters van elke plant in die Departement Parasitologie aan die Carnegie Mellon Universiteit se Skool vir Geneeskunde gestoor vir toekomstige gebruik.
Plantmonsters is individueel vir 3-5 dae in 'n oop ruimte met aktiewe ventilasie en 'n omgewingstemperatuur van ongeveer 30 ± 5 °C in die skadu gedroog om voginhoud te verwyder voor die ekstraksie van natuurlike essensiële olies (EO's). 'n Totaal van 250 g van elke droë plantmateriaal is meganies tot 'n growwe poeier gemaal en gebruik om essensiële olies (EO's) deur stoomdistillasie te isoleer. Die distillasie-apparaat het bestaan ​​uit 'n elektriese verhittingsmantel, 'n 3000 ml rondebodemfles, 'n ekstraksiekolom, 'n kondensor en 'n Cool Ace-toestel (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokio, Japan). Voeg 1600 ml gedistilleerde water en 10-15 glaskrale by die fles en verhit dit dan tot ongeveer 100 °C met behulp van 'n elektriese verwarmer vir ten minste 3 uur totdat die distillasie voltooi is en geen EO meer geproduseer word nie. Die EO-laag is van die waterige fase geskei met behulp van 'n skeitregter, oor anhidriese natriumsulfaat (Na2SO4) gedroog en in 'n verseëlde bruin bottel by 4°C gestoor totdat die chemiese samestelling en volwasse aktiwiteit ondersoek is.
Die chemiese samestelling van essensiële olies is gelyktydig met die bio-analise vir die volwasse stof uitgevoer. Kwalitatiewe analise is uitgevoer met behulp van 'n GC-MS-stelsel wat bestaan ​​uit 'n Hewlett-Packard (Wilmington, CA, VSA) 7890A gaschromatograaf toegerus met 'n enkelkwadrupool massa-selektiewe detektor (Agilent Technologies, Wilmington, CA, VSA) en 'n MSD 5975C (EI). (Agilent Technologies).
Chromatografiese kolom – DB-5MS (30 m × ID 0.25 mm × filmdikte 0.25 µm). Die totale GC-MS-looptyd was 20 minute. Die analisevoorwaardes is dat die inspuiter- en oordraglyntemperature onderskeidelik 250 en 280 °C is; die oondtemperatuur is ingestel om van 50 °C tot 250 °C te styg teen 'n tempo van 10 °C/min, die draergas is helium; vloeitempo 1.0 ml/min; inspuitvolume is 0.2 µL (1/10% volgens volume in CH2Cl2, splitsverhouding 100:1); 'n Elektronionisasiestelsel met 'n ionisasie-energie van 70 eV word gebruik vir GC-MS-deteksie. Die verkrygingsbereik is 50–550 atoommassa-eenhede (amu) en die skanderingspoed is 2.91 skanderings per sekonde. Relatiewe persentasies van komponente word uitgedruk as persentasies genormaliseer volgens piekarea. Identifikasie van EO-bestanddele is gebaseer op hul retensie-indeks (RI). RI is bereken met behulp van die vergelyking van Van den Dool en Kratz [37] vir die n-alkane-reeks (C8-C40) en vergelyk met retensie-indekse uit die literatuur [38] en biblioteekdatabasisse (NIST 2008 en Wiley 8NO8). Die identiteit van die getoonde verbindings, soos struktuur en molekulêre formule, is bevestig deur vergelyking met beskikbare outentieke monsters.
Analitiese standaarde vir sintetiese permetrien en piperonielbutoksied (PBO, positiewe kontrole in sinergiestudies) is aangekoop van Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, VSA). Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) se toetsstelle vir volwassenes en diagnostiese dosisse permetrien-geïmpregneerde papier (0.75%) is kommersieel aangekoop van die WGO Vektorbeheersentrum in Penang, Maleisië. Alle ander chemikalieë en reagense wat gebruik is, was van analitiese graad en is aangekoop van plaaslike instellings in die Chiang Mai-provinsie, Thailand.
Die muskiete wat as toetsorganismes in die volwasse bio-assay gebruik is, was vrylik parende laboratoriummuskiete van die Aedes-soort aegypti, insluitend die vatbare Muang Chiang Mai-stam (MCM-S) en die weerstandige Pang Mai Dang-stam (PMD-R). Stam MCM-S is verkry uit plaaslike monsters wat in die Muang Chiang Mai-gebied, Chiang Mai-provinsie, Thailand, versamel is en word sedert 1995 in die entomologiekamer van die Departement Parasitologie, CMU Skool vir Geneeskunde, gehou [39]. Die PMD-R-stam, wat bestand is teen permetrien, is geïsoleer uit veldmuskiete wat oorspronklik versamel is uit Ban Pang Mai Dang, Mae Tang-distrik, Chiang Mai-provinsie, Thailand, en word sedert 1997 by dieselfde instituut gehou [40]. PMD-R-stamme is onder selektiewe druk gekweek om weerstandsvlakke te handhaaf deur intermitterende blootstelling aan 0,75% permetrien met behulp van die WHO-opsporingstel met 'n paar wysigings [41]. Elke stam van Ae. Aedes aegypti is individueel gekoloniseer in 'n patogeenvrye laboratorium by 25 ± 2 °C en 80 ± 10% relatiewe humiditeit en 'n lig/donker fotoperiode van 14:10 uur. Ongeveer 200 larwes is in plastiekbakkies (33 cm lank, 28 cm breed en 9 cm hoog) gehou, gevul met kraanwater teen 'n digtheid van 150–200 larwes per bakkie en twee keer per dag gevoer met gesteriliseerde hondekoekies. Volwasse wurms is in klam hokke gehou en voortdurend gevoer met 'n 10% waterige sukrose-oplossing en 'n 10% multivitamienstroopoplossing. Wyfiemuskiete suig gereeld bloed om eiers te lê. Wyfies van twee tot vyf dae oud wat nie met bloed gevoer is nie, kan voortdurend in eksperimentele biologiese toetse van volwasse muskiete gebruik word.
'n Dosis-mortaliteitsrespons-biotoets van EO is uitgevoer op volwasse vroulike Aedes-muskiete, aegypti, MCM-S en PMD-R met behulp van 'n topiese metode wat aangepas is volgens die WGO-standaardprotokol vir vatbaarheidstoetsing [42]. EO van elke plant is serieel verdun met 'n geskikte oplosmiddel (bv. etanol of asetoon) om 'n gegradeerde reeks van 4-6 konsentrasies te verkry. Na narkose met koolstofdioksied (CO2) is muskiete individueel geweeg. Die verdoofde muskiete is toe bewegingloos gehou op droë filterpapier op 'n pasgemaakte koue plaat onder 'n stereomikroskoop om heraktivering tydens die prosedure te voorkom. Vir elke behandeling is 0.1 μl EO-oplossing op die wyfie se boonste pronotum toegedien met behulp van 'n Hamilton-handmikrodispenser (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, VSA). Vyf-en-twintig wyfies is met elke konsentrasie behandel, met mortaliteit wat wissel van 10% tot 95% vir ten minste 4 verskillende konsentrasies. Muskiete wat met oplosmiddel behandel is, het as kontrole gedien. Om kontaminasie van toetsmonsters te voorkom, vervang die filterpapier met nuwe filterpapier vir elke EO wat getoets word. Dosisse wat in hierdie bio-assays gebruik word, word uitgedruk in mikrogram EO per milligram lewende vroulike liggaamsgewig. Volwasse PBO-aktiwiteit is ook op 'n soortgelyke wyse as EO geassesseer, met PBO wat as 'n positiewe kontrole in sinergistiese eksperimente gebruik is. Behandelde muskiete in alle groepe is in plastiekbekers geplaas en 10% sukrose plus 10% multivitamienstroop gegee. Alle bio-assays is uitgevoer by 25 ± 2 °C en 80 ± 10% relatiewe humiditeit en vier keer met kontroles herhaal. Mortaliteit gedurende die 24-uur grootmaakperiode is nagegaan en bevestig deur die muskiet se gebrek aan reaksie op meganiese stimulasie en toe aangeteken op grond van die gemiddelde van vier replikate. Eksperimentele behandelings is vier keer herhaal vir elke toetsmonster met behulp van verskillende groepe muskiete. Die resultate is opgesom en gebruik om die persentasie mortaliteitsyfer te bereken, wat gebruik is om die 24-uur dodelike dosis deur middel van probit-analise te bepaal.
Die sinergistiese antidodende effek van EO en permetrien is geassesseer met behulp van 'n plaaslike toksisiteitstoetsprosedure [42] soos voorheen beskryf. Gebruik asetoon of etanol as oplosmiddel om permetrien teen die verlangde konsentrasie voor te berei, sowel as 'n binêre mengsel van EO en permetrien (EO-permetrien: permetrien gemeng met EO teen LD25-konsentrasie). Toetsstelle (permetrien en EO-permetrien) is geëvalueer teen MCM-S- en PMD-R-stamme van Ae. Aedes aegypti. Elk van 25 vroulike muskiete het vier dosisse permetrien ontvang om die doeltreffendheid daarvan in die doodmaak van volwassenes te toets, met elke behandeling vier keer herhaal. Om kandidaat-EO-sinergiste te identifiseer, is 4 tot 6 dosisse EO-permetrien aan elk van 25 vroulike muskiete toegedien, met elke toediening vier keer herhaal. PBO-permetrienbehandeling (permetrien gemeng met LD25-konsentrasie van PBO) het ook as 'n positiewe kontrole gedien. Die dosisse wat in hierdie bio-assays gebruik word, word uitgedruk in nanogram toetsmonster per milligram lewende vroulike liggaamsgewig. Vier eksperimentele evaluasies vir elke muskietstam is op individueel grootgemaakte groepe uitgevoer, en mortaliteitsdata is saamgevoeg en geanaliseer met behulp van Probit om 'n 24-uur dodelike dosis te bepaal.
Die mortaliteitsyfer is aangepas met behulp van die Abbott-formule [43]. Die aangepaste data is geanaliseer deur Probit-regressie-analise met behulp van die rekenaarstatistiekprogram SPSS (weergawe 19.0). Letale waardes van 25%, 50%, 90%, 95% en 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 en LD99, onderskeidelik) is bereken met behulp van die ooreenstemmende 95%-vertrouensintervalle (95% KI). Metings van betekenisvolheid en verskille tussen toetsmonsters is beoordeel met behulp van die chi-kwadraattoets of Mann-Whitney U-toets binne elke biologiese toets. Resultate is as statisties betekenisvol beskou by P.< 0.05. Die weerstandskoëffisiënt (RR) word op die LD50-vlak beraam deur die volgende formule [12] te gebruik:
RR > 1 dui weerstand aan, en RR ≤ 1 dui sensitiwiteit aan. Die sinergieverhouding (SR) waarde van elke sinergis kandidaat word soos volg bereken [34, 35, 44]:
Hierdie faktor verdeel die resultate in drie kategorieë: 'n SR-waarde van 1 ± 0,05 word beskou as geen ooglopende effek nie, 'n SR-waarde van > 1,05 word beskou as 'n sinergistiese effek, en 'n SR-waarde van . 'n Liggeel vloeibare olie kan verkry word deur stoomdistillasie van die risome van C. rotundus en A. galanga en die bas van C. verum. Opbrengste bereken op droë gewig was onderskeidelik 0,15%, 0,27% (g/g) en 0,54% (v/v) (g) (Tabel 1). GC-MS-studie van die chemiese samestelling van olies van C. rotundus, A. galanga en C. verum het die teenwoordigheid van 19, 17 en 21 verbindings getoon, wat onderskeidelik 80,22, 86,75 en 97,24% van alle komponente uitgemaak het (Tabel 2). C. lucidum-risoololieverbindings bestaan ​​hoofsaaklik uit siperoneen (14,04%), gevolg deur karraleen (9,57%), α-kapsellaan (7,97%) en α-kapsellaan (7,53%). Die hoofchemiese komponent van galangal-risoololie is β-bisaboleen (18,27%), gevolg deur α-bergamoteen (16,28%), 1,8-sinol (10,17%) en piperonol (10,09%). Terwyl cinnamaldehied (64,66%) as die hoofkomponent van C. verum-basolie geïdentifiseer is, is cinnamiese asetaat (6,61%), α-kopaeen (5,83%) en 3-fenielpropionaldehied (4,09%) as minder belangrike bestanddele beskou. Die chemiese strukture van siperone, β-bisaboleen en cinnamaldehied is die hoofverbindings van onderskeidelik C. rotundus, A. galanga en C. verum, soos in Figuur 2 getoon.
Resultate van drie OO's het volwasse aktiwiteit teen Aedes-muskiete geassesseer. aegypti-muskiete word in Tabel 3 getoon. Daar is gevind dat alle EO's dodelike effekte op MCM-S Aedes-muskiete teen verskillende tipes en dosisse het. Aedes aegypti. Die mees effektiewe EO is C. verum, gevolg deur A. galanga en C. rotundus met LD50-waardes van onderskeidelik 3.30, 7.97 en 10.05 μg/mg MCM-S-wyfies, effens hoër as 3.22 (U = 1), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94 (U = 2, Z = 0, P = 1) en 9.57 (U = 0, Z = -1.549, P = 0.333) μg/mg PMD-R by vroue. Dit stem ooreen met PBO wat 'n effens hoër volwasse effek op PMD-R het as die MSM-S-stam, met LD50-waardes van onderskeidelik 4.79 en 6.30 μg/mg wyfies (U = 0, Z = -2.021, P = 0.057). Daar kan bereken word dat die LD50-waardes van C. verum, A. galanga, C. rotundus en PBO teen PMD-R ongeveer 0.98, 0.99, 0.95 en 0.76 keer laer is as dié teen MCM-S, onderskeidelik. Dit dui dus daarop dat die vatbaarheid vir PBO en EO relatief soortgelyk is tussen die twee Aedes-stamme. Alhoewel PMD-R meer vatbaar was as MCM-S, was die sensitiwiteit van Aedes aegypti nie beduidend nie. In teenstelling hiermee het die twee Aedes-stamme baie verskil in hul sensitiwiteit vir permetrien aegypti (Tabel 4). PMD-R het beduidende weerstand teen permetrien (LD50-waarde = 0.44 ng/mg in vroue) getoon, met 'n hoër LD50-waarde van 3.70 in vergelyking met MCM-S (LD50-waarde = 0.44 ng/mg in vroue) ng/mg in vroue (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029). Alhoewel PMD-R baie minder sensitief vir permetrien is as MCM-S, is die sensitiwiteit daarvan vir PBO en C. verum-, A. galanga- en C. rotundus-olies effens hoër as MCM-S.
Soos waargeneem in die volwasse populasie-bio-assay van die EO-permetrien-kombinasie, het binêre mengsels van permetrien en EO (LD25) óf sinergie (SR-waarde > 1.05) óf geen effek (SR-waarde = 1 ± 0.05) getoon nie. Komplekse volwasse effekte van 'n EO-permetrienmengsel op eksperimentele albino-muskiete. Aedes aegypti-stamme MCM-S en PMD-R word in Tabel 4 en Figuur 3 getoon. Daar is gevind dat die byvoeging van C. verum-olie die LD50 van permetrien teen MCM-S effens verminder en die LD50 teen PMD-R effens verhoog tot 0.44–0.42 ng/mg by vroue en van 3.70 tot 3.85 ng/mg by vroue, onderskeidelik. In teenstelling hiermee het die byvoeging van C. rotundus- en A. galanga-olies die LD50 van permetrien op MCM-S aansienlik verminder van 0.44 tot 0.07 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) en tot 0.11 (U = 0). , Z) = -2.309, P = 0.029) ng/mg vroue. Gebaseer op die LD50-waardes van MCM-S, was die SR-waardes van die EO-permetrienmengsel na die byvoeging van C. rotundus- en A. galanga-olies onderskeidelik 6.28 en 4.00. Gevolglik het die LD50 van permetrien teen PMD-R beduidend afgeneem van 3.70 tot 0.42 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) en tot 0.003 met die byvoeging van C. rotundus- en A. galanga-olies (U = 0). , Z = -2.337, P = 0.029) ng/mg vroulik. Die SR-waarde van permetrien gekombineer met C. rotundus teen PMD-R was 8.81, terwyl die SR-waarde van die galangal-permetrienmengsel 1233.33 was. Relatief tot MCM-S, het die LD50-waarde van die positiewe kontrole PBO afgeneem van 0.44 tot 0.26 ng/mg (wyfies) en van 3.70 ng/mg (wyfies) tot 0.65 ng/mg (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) en PMD-R (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029). Die SR-waardes van die PBO-permetrienmengsel vir stamme MCM-S en PMD-R was onderskeidelik 1.69 en 5.69. Hierdie resultate dui daarop dat C. rotundus- en A. galanga-olies en PBO permetrien-toksisiteit in 'n groter mate verhoog as C. verum-olie vir stamme MCM-S en PMD-R.
Volwasse aktiwiteit (LD50) van EO, PBO, permetrien (PE) en hul kombinasies teen piretroïed-sensitiewe (MCM-S) en weerstandbiedende (PMD-R) stamme van Aedes-muskiete. Aedes aegypti
[45]. Sintetiese piretroïede word wêreldwyd gebruik om byna alle geleedpotiges van landboukundige en mediese belang te beheer. As gevolg van die skadelike gevolge van die gebruik van sintetiese insekdoders, veral in terme van die ontwikkeling en wydverspreide weerstand van muskiete, sowel as die impak op langtermyn gesondheid en die omgewing, is daar egter nou 'n dringende behoefte om die gebruik van tradisionele sintetiese insekdoders te verminder en alternatiewe te ontwikkel [35, 46, 47]. Benewens die beskerming van die omgewing en menslike gesondheid, sluit die voordele van botaniese insekdoders hoë selektiwiteit, wêreldwye beskikbaarheid en gemak van produksie en gebruik in, wat hulle aantrekliker maak vir muskietbeheer [32,48, 49]. Hierdie studie het, benewens die verduideliking van die chemiese eienskappe van effektiewe essensiële olies deur GC-MS-analise, ook die sterkte van volwasse essensiële olies en hul vermoë om die toksisiteit van sintetiese permetrien aegypti in piretroïed-sensitiewe stamme (MCM-S) en weerstandbiedende stamme (PMD-R) te verhoog, beoordeel.
GC-MS karakterisering het getoon dat sipern (14.04%), β-bisaboleen (18.27%) en sinnamaldehied (64.66%) die hoofkomponente van onderskeidelik C. rotundus-, A. galanga- en C. verum-olies was. Hierdie chemikalieë het uiteenlopende biologiese aktiwiteite getoon. Ahn et al. [50] het berig dat 6-asetoksisiperen, geïsoleer uit die risoom van C. rotundus, as 'n antitumorverbinding optree en kaspase-afhanklike apoptose in eierstokkankerselle kan veroorsaak. β-Bisaboleen, onttrek uit die essensiële olie van die mirreboom, toon spesifieke sitotoksisiteit teen menslike en muis-mammariese tumorselle, beide in vitro en in vivo [51]. Sinamaldehied, verkry uit natuurlike ekstrakte of gesintetiseer in die laboratorium, het berig dat dit insekdodende, antibakteriese, antifungale, anti-inflammatoriese, immunomodulerende, antikanker- en antiangiogeniese aktiwiteite het [52].
Die resultate van die dosisafhanklike volwasse aktiwiteitsbio-assay het goeie potensiaal van die getoetste EO's getoon en het getoon dat die Aedes-muskietstamme MCM-S en PMD-R soortgelyke vatbaarheid vir EO en PBO gehad het. Aedes aegypti. 'n Vergelyking van die effektiwiteit van EO en permetrien het getoon dat laasgenoemde 'n sterker allerdodende effek het: LD50-waardes is onderskeidelik 0.44 en 3.70 ng/mg by wyfies vir die stamme MCM-S en PMD-R. Hierdie bevindinge word ondersteun deur baie studies wat toon dat natuurlik voorkomende plaagdoders, veral plant-afgeleide produkte, oor die algemeen minder effektief is as sintetiese stowwe [31, 34, 35, 53, 54]. Dit kan wees omdat eersgenoemde 'n komplekse kombinasie van aktiewe of onaktiewe bestanddele is, terwyl laasgenoemde 'n gesuiwerde enkele aktiewe verbinding is. Die diversiteit en kompleksiteit van natuurlike aktiewe bestanddele met verskillende werkingsmeganismes kan egter biologiese aktiwiteit verhoog of die ontwikkeling van weerstand in gasheerpopulasies belemmer [55, 56, 57]. Baie navorsers het die anti-muskietpotensiaal van C. verum, A. galanga en C. rotundus en hul komponente soos β-bisaboleen, cinnamaldehied en 1,8-cineol gerapporteer [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63,64]. 'n Oorsig van die literatuur het egter aan die lig gebring dat daar geen vorige verslae was van die sinergistiese effek daarvan met permetrien of ander sintetiese insekdoders teen Aedes-muskiete nie. Aedes aegypti.
In hierdie studie is beduidende verskille in permetrien-vatbaarheid tussen die twee Aedes-stamme waargeneem. Aedes aegypti. MCM-S is sensitief vir permetrien, terwyl PMD-R baie minder sensitief daarvoor is, met 'n weerstandskoers van 8.41. In vergelyking met die sensitiwiteit van MCM-S, is PMD-R minder sensitief vir permetrien, maar meer sensitief vir EO, ​​wat 'n basis bied vir verdere studies wat daarop gemik is om die effektiwiteit van permetrien te verhoog deur dit met EO te kombineer. 'n Sinergistiese kombinasie-gebaseerde biotoets vir volwasse effekte het getoon dat binêre mengsels van EO en permetrien die mortaliteit van volwasse Aedes verminder of verhoog het. Aedes aegypti. Die byvoeging van C. verum-olie het die LD50 van permetrien teen MCM-S effens verlaag, maar die LD50 teen PMD-R effens verhoog met SR-waardes van onderskeidelik 1.05 en 0.96. Dit dui daarop dat C. verum-olie nie 'n sinergistiese of antagonistiese effek op permetrien het wanneer dit op MCM-S en PMD-R getoets word nie. In teenstelling hiermee het C. rotundus- en A. galanga-olies 'n beduidende sinergistiese effek getoon deur die LD50-waardes van permetrien op MCM-S of PMD-R aansienlik te verminder. Toe permetrien gekombineer is met EO van C. rotundus en A. galanga, was die SR-waardes van die EO-permetrienmengsel vir MCM-S onderskeidelik 6.28 en 4.00. Daarbenewens, toe permetrien geëvalueer is teen PMD-R in kombinasie met C. rotundus (SR = 8.81) of A. galanga (SR = 1233.33), het SR-waardes aansienlik toegeneem. Dit is opmerklik dat beide C. rotundus en A. galanga die toksisiteit van permetrien teen PMD-R Ae. aegypti aansienlik verhoog het. Net so is gevind dat PBO die toksisiteit van permetrien verhoog met SR-waardes van onderskeidelik 1.69 en 5.69 vir stamme MCM-S en PMD-R. Aangesien C. rotundus en A. galanga die hoogste SR-waardes gehad het, is hulle beskou as die beste sinergiste om permetrien-toksisiteit op onderskeidelik MCM-S en PMD-R te verhoog.
Verskeie vorige studies het die sinergistiese effek van kombinasies van sintetiese insekdoders en plantekstrakte teen verskeie muskietspesies gerapporteer. 'n Larvisidiese bio-toets teen Anopheles Stephensi, bestudeer deur Kalayanasundaram en Das [65], het getoon dat fention, 'n breëspektrum organofosfaat, geassosieer is met Cleodendron inerme, Pedalium murax en Parthenium hysterophorus. Beduidende sinergie is waargeneem tussen die ekstrakte met 'n sinergistiese effek (SF) van onderskeidelik 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 en 2.23. In 'n larvisidiese sifting van 15 mangrovespesies, is petroleumeter-ekstrak van mangrove-stelwortels as die doeltreffendste teen Culex quinquefasciatus met 'n LC50-waarde van 25.7 mg/L [66] gevind. Die sinergistiese effek van hierdie uittreksel en die botaniese insekdoder piretrum is ook berig om die LC50 van piretrum teen C. quinquefasciatus-larwes van 0.132 mg/L tot 0.107 mg/L te verminder, en boonop is 'n SF-berekening van 1.23 in hierdie studie gebruik. 34,35,44]. Die gekombineerde effektiwiteit van Solanum-sitronworteluittreksel en verskeie sintetiese insekdoders (bv. fention, sipermetrien (’n sintetiese piretroïed) en timethphos (’n organofosfor-larvisid)) teen Anopheles-muskiete is geëvalueer. Stephensi [54] en C. quinquefasciatus [34]. Die gekombineerde gebruik van sipermetrien en geelvrugte-petroleumeter-uittreksel het 'n sinergistiese effek op sipermetrien in alle verhoudings getoon. Die mees effektiewe verhouding was die 1:1 binêre kombinasie met LC50- en SF-waardes van onderskeidelik 0.0054 dpm en 6.83 relatief tot An. Stephen West[54]. Terwyl 'n 1:1 binêre mengsel van S. xanthocarpum en temephos antagonisties was (SF = 0.6406), het die S. xanthocarpum-fention-kombinasie (1:1) sinergistiese aktiwiteit teen C. quinquefasciatus met 'n SF van 1.3125 [34] getoon. Tong en Blomquist [35] het die effekte van plant-etileenoksied op die toksisiteit van karbariel (’n breëspektrum-karbamaat) en permetrien vir Aedes-muskiete bestudeer. Aedes aegypti. Die resultate het getoon dat etileenoksied van agar, swartpeper, jenewer, helichrysum, sandelhout en sesam die toksisiteit van karbariel vir Aedes-muskiete verhoog het. Aegypti-larwes se SR-waardes wissel van 1.0 tot 7.0. In teenstelling hiermee was geeneen van die EO's toksies vir volwasse Aedes-muskiete nie. Op hierdie stadium is geen sinergistiese effekte gerapporteer vir die kombinasie van Aedes aegypti en EO-karbariel nie. PBO is as 'n positiewe kontrole gebruik om die toksisiteit van karbariel teen Aedes-muskiete te verhoog. Die SR-waardes van Aedes aegypti-larwes en volwassenes is onderskeidelik 4.9-9.5 en 2.3. Slegs binêre mengsels van permetrien en EO of PBO is getoets vir larvisidale aktiwiteit. Die EO-permetrienmengsel het 'n antagonistiese effek gehad, terwyl die PBO-permetrienmengsel 'n sinergistiese effek teen Aedes-muskiete gehad het. Larwes van Aedes aegypti. Dosisrespons-eksperimente en SR-evaluering vir PBO-permetrienmengsels is egter nog nie uitgevoer nie. Alhoewel min resultate behaal is rakende die sinergistiese effekte van fitosintetiese kombinasies teen muskietvektore, ondersteun hierdie data die bestaande resultate, wat die moontlikheid oopmaak om sinergiste by te voeg, nie net om die toegepaste dosis te verminder nie, maar ook om die doodmaakeffek te verhoog. Doeltreffendheid van insekte. Daarbenewens het die resultate van hierdie studie vir die eerste keer getoon dat C. rotundus- en A. galanga-olies sinergisties beduidend hoër doeltreffendheid teen piretroïed-vatbare en piretroïed-weerstandige stamme van Aedes-muskiete uitoefen in vergelyking met PBO wanneer dit met permetrien-toksisiteit gekombineer word. Aedes aegypti. Onverwagte resultate van die sinergistiese analise het egter getoon dat C. verum-olie die grootste anti-volwasse aktiwiteit teen beide Aedes-stamme gehad het. Verrassend genoeg was die toksiese effek van permetrien op Aedes aegypti onbevredigend. Variasies in toksiese effekte en sinergistiese effekte kan deels te wyte wees aan blootstelling aan verskillende tipes en vlakke van bioaktiewe komponente in hierdie olies.
Ten spyte van pogings om te verstaan ​​hoe om doeltreffendheid te verbeter, bly die sinergistiese meganismes onduidelik. Moontlike redes vir die verskillende doeltreffendheid en sinergistiese potensiaal kan insluit verskille in die chemiese samestelling van die produkte wat getoets is en verskille in muskietvatbaarheid wat verband hou met weerstandstatus en -ontwikkeling. Daar is verskille tussen die hoof- en kleiner etileenoksiedkomponente wat in hierdie studie getoets is, en sommige van hierdie verbindings het getoon dat hulle afstotende en toksiese effekte teen 'n verskeidenheid plae en siektevektore het [61,62,64,67,68]. Die hoofverbindings wat in C. rotundus-, A. galanga- en C. verum-olies gekenmerk word, soos sipern, β-bisaboleen en cinnamaldehied, is egter nie in hierdie artikel getoets vir hul anti-volwasse en sinergistiese aktiwiteite teen onderskeidelik Ae, Aedes aegypti nie. Daarom is toekomstige studies nodig om die aktiewe bestanddele wat in elke essensiële olie teenwoordig is, te isoleer en hul insekdodende doeltreffendheid en sinergistiese interaksies teen hierdie muskietvektor te verduidelik. Oor die algemeen hang insekdodende aktiwiteit af van die werking en reaksie tussen gifstowwe en insekweefsel, wat vereenvoudig en in drie stadiums verdeel kan word: penetrasie in die insekliggaamvel en teikenorgaanmembrane, aktivering (= interaksie met die teiken) en ontgifting van giftige stowwe [57, 69]. Daarom vereis insekdoder-sinergisme wat lei tot verhoogde doeltreffendheid van toksiese kombinasies ten minste een van hierdie kategorieë, soos verhoogde penetrasie, groter aktivering van opgehoopte verbindings, of minder verminderde ontgifting van die plaagdoder-aktiewe bestanddeel. Byvoorbeeld, energietoleransie vertraag kutikula-penetrasie deur 'n verdikte kutikula en biochemiese weerstand, soos verbeterde insekdodermetabolisme wat in sommige weerstandige insekstamme waargeneem word [70, 71]. Die beduidende doeltreffendheid van EO's in die verhoging van die toksisiteit van permetrien, veral teen PMD-R, kan 'n oplossing vir die probleem van insekdoderweerstand aandui deur interaksie met weerstandsmeganismes [57, 69, 70, 71]. Tong en Blomquist [35] het die resultate van hierdie studie ondersteun deur 'n sinergistiese interaksie tussen EO's en sintetiese plaagdoders aan te toon. aegypti, is daar bewyse van inhiberende aktiwiteit teen ontgiftende ensieme, insluitend sitochroom P450 monooksigenases en karboksilesterases, wat nou verband hou met die ontwikkeling van weerstand teen tradisionele plaagdoders. PBO word nie net as 'n metaboliese inhibeerder van sitochroom P450 monooksigenase beskou nie, maar verbeter ook die penetrasie van insekdoders, soos gedemonstreer deur die gebruik daarvan as 'n positiewe kontrole in sinergistiese studies [35, 72]. Interessant genoeg is 1,8-cineol, een van die belangrike komponente wat in galangalolie voorkom, bekend vir sy toksiese effekte op insekspesies [22, 63, 73] en is berig dat dit sinergistiese effekte in verskeie areas van biologiese aktiwiteitsnavorsing het [74]. . ,75,76,77]. Daarbenewens het 1,8-cineol in kombinasie met verskeie middels, insluitend kurkumien [78], 5-fluorourasiel [79], mefenamiensuur [80] en sidovudien [81], ook 'n permeasiebevorderende effek in vitro. Dus, die moontlike rol van 1,8-cineol in sinergistiese insekdodende werking is nie net as 'n aktiewe bestanddeel nie, maar ook as 'n penetrasieversterker. As gevolg van groter sinergisme met permetrien, veral teen PMD-R, kan die sinergistiese effekte van galangalolie en trichosante-olie wat in hierdie studie waargeneem is, voortspruit uit interaksies met weerstandsmeganismes, dws verhoogde deurlaatbaarheid vir chloor. Piretroïede verhoog die aktivering van opgehoopte verbindings en inhibeer ontgiftende ensieme soos sitochroom P450 monooksigenases en karboksilesterases. Hierdie aspekte vereis egter verdere studie om die spesifieke rol van EO en sy geïsoleerde verbindings (alleen of in kombinasie) in sinergistiese meganismes te verduidelik.
In 1977 is toenemende vlakke van permetrienweerstand in groot vektorpopulasies in Thailand aangemeld, en oor die volgende dekades is die gebruik van permetrien grootliks vervang deur ander piretroïedchemikalieë, veral dié wat deur deltametrien vervang is [82]. Vektorweerstand teen deltametrien en ander klasse insekdoders is egter uiters algemeen regdeur die land as gevolg van oormatige en volgehoue ​​gebruik [14, 17, 83, 84, 85, 86]. Om hierdie probleem te bestry, word dit aanbeveel om weggegooide plaagdoders wat voorheen effektief en minder giftig vir soogdiere was, soos permetrien, te roteer of te hergebruik. Tans, hoewel die gebruik van permetrien in onlangse nasionale regeringsmuskietbeheerprogramme verminder is, kan permetrienweerstand steeds in muskietpopulasies gevind word. Dit kan wees as gevolg van die blootstelling van muskiete aan kommersiële huishoudelike plaagbeheerprodukte, wat hoofsaaklik uit permetrien en ander piretroïede bestaan ​​[14, 17]. Dus vereis suksesvolle hergebruik van permetrien die ontwikkeling en implementering van strategieë om vektorweerstand te verminder. Alhoewel geeneen van die essensiële olies wat individueel in hierdie studie getoets is, so effektief soos permetrien was nie, het die samewerking met permetrien indrukwekkende sinergistiese effekte tot gevolg gehad. Dit is 'n belowende aanduiding dat die interaksie van EO met weerstandsmeganismes daartoe lei dat die kombinasie van permetrien met EO meer effektief is as die insekdoder of EO alleen, veral teen PMD-R Ae. Aedes aegypti. Die voordele van sinergistiese mengsels in die verhoging van doeltreffendheid, ten spyte van die gebruik van laer dosisse vir vektorbeheer, kan lei tot verbeterde weerstandsbestuur en verminderde koste [33, 87]. Uit hierdie resultate is dit aangenaam om daarop te let dat A. galanga en C. rotundus EO's aansienlik meer effektief was as PBO in die sinergisering van permetrien-toksisiteit in beide MCM-S- en PMD-R-stamme en 'n potensiële alternatief vir tradisionele ergogeniese hulpmiddels is.
Die geselekteerde EO's het beduidende sinergistiese effekte gehad in die verbetering van volwasse toksisiteit teen PMD-R. Ae. aegypti, veral galangalolie, het 'n SR-waarde van tot 1233.33, wat aandui dat EO breë belofte het as 'n sinergis in die verbetering van die doeltreffendheid van permetrien. Dit kan die gebruik van 'n nuwe aktiewe natuurlike produk stimuleer, wat saam die gebruik van hoogs effektiewe muskietbeheerprodukte kan verhoog. Dit onthul ook die potensiaal van etileenoksied as 'n alternatiewe sinergis om ouer of tradisionele insekdoders effektief te verbeter om bestaande weerstandsprobleme in muskietbevolkings aan te spreek. Die gebruik van geredelik beskikbare plante in muskietbeheerprogramme verminder nie net die afhanklikheid van ingevoerde en duur materiale nie, maar stimuleer ook plaaslike pogings om openbare gesondheidstelsels te versterk.
Hierdie resultate toon duidelik die beduidende sinergistiese effek wat deur die kombinasie van etileenoksied en permetrien geproduseer word. Die resultate beklemtoon die potensiaal van etileenoksied as 'n plantsinergis in muskietbeheer, wat die doeltreffendheid van permetrien teen muskiete verhoog, veral in weerstandige populasies. Toekomstige ontwikkelings en navorsing sal sinergistiese bioanalise van galangal- en alpinia-olies en hul geïsoleerde verbindings, kombinasies van insekdoders van natuurlike of sintetiese oorsprong teen verskeie spesies en stadiums van muskiete, en toksisiteitstoetsing teen nie-teikenorganismes vereis. Praktiese gebruik van etileenoksied as 'n lewensvatbare alternatiewe sinergis.
Wêreldgesondheidsorganisasie. Globale strategie vir die voorkoming en beheer van dengue 2012–2020. Genève: Wêreldgesondheidsorganisasie, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al. Zika-virus: geskiedenis, opkoms, biologie en beheervooruitsigte. Antivirale navorsing. 2016;130:69–80.
Wêreldgesondheidsorganisasie. Dengue-feiteblad. 2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/. Toegang verkry op: 20 Januarie 2017
Departement van Openbare Gesondheid. Huidige status van dengue-koors en dengue-hemorragiese koorsgevalle in Thailand. 2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf. Toegang verkry op: 6 Januarie 2017.
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ. 35 jaar van dengue-voorkoming en vektorbeheer in Singapoer. Skielike aansteeklike siekte. 2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identifiseer uitdagings en stel oplossings voor om Aedes aegypti virale vektore te beheer. PLOS Medicine. 2008;5:362–6.
Sentrums vir Siektebeheer en -voorkoming. Dengue-koors, entomologie en ekologie. 2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/. Toegang verkry op: 6 Januarie 2017.
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Vergelyking van larvisidiese aktiwiteit van blare, bas, stingels en wortels van Jatropa curcas (Euphorbiaceae) teen die malariavektor Anopheles gambiae. SZhBR. 2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Habitatkenmerke van Anopheles-larwes in malariagebiede van die malaria-uitwissingsprogram in suidoostelike Iran. Asia Pacific J Trop Biomed. 2014;4(Aanvulling 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Oorsig van benaderings tot vektorbeheer, voorkoming en beheer van Wes-Nyl-virusuitbrake, en uitdagings waarmee Europa te kampe het. Parasietevektor. 2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Seleksie en molekulêre meganismes van sipermetrienweerstand in rooi ruspes (Amsacta albistriga Walker). Biochemiese fisiologie van plae. 2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratoriumstudie van permetrienweerstand en kruisweerstand van Culex quinquefasciatus teen ander insekdoders. Palastor Navorsingsentrum. 2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD. Plaagdoderchemie: Menslike Welsyn en die Omgewing, Vol. 3: Werkingsmeganisme, metabolisme en toksikologie. New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. 'n Oorsig van insekdoderweerstand en gedragsvermyding van menslike siektevektore in Thailand. Parasietevektor. 2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Huidige patrone van insekdoderweerstand onder muskietvektore in Thailand. Suidoos-Asië J Trop Med Public Health. 1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Status van malaria in Thailand. Suidoos-Asië J Trop Med Openbare Gesondheid. 2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Temporale frekwensie van F1534C en V1016G knockdown weerstandsmutasies in Aedes aegypti muskiete in Chiang Mai, Thailand, en die impak van mutasies op doeltreffendheid van termiese misspuitmiddels wat piretroïede bevat. Aktatrop. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Insekdoderweerstand in die hoof dengue-vektore Aedes albopictus en Aedes aegypti. Biochemiese fisiologie van plae. 2012;104:126–31.

 


Plasingstyd: 8 Julie 2024