Die ontwikkeling van betroubare en gestandaardiseerde metodes vir die toets van muskietswerms se vatbaarheid vir insekdoders is van kritieke belang om die doeltreffendheid van nuwe aktiewe bestanddele of formulerings te verstaan. Metodes vir die toets van muskietswerms se vatbaarheid vir kontakinsekdoders of -produkte (soos dié wat in openbare gesondheidsprogramme bevorder word) is goed gevestig en gestandaardiseer. Toetsmetodes vir vlugtige of aërosol-insekdoders wat in huishoudelike produkte gebruik word, is egter moeilik om effektief te implementeer. Gebaseer op die aanbevelings van die Wêreldgesondheidsorganisasie vir huishoudelike insekdoders, het ons 'n gestandaardiseerde en hoë-deursetmetode ontwikkel vir die toets van aërosolprodukte met behulp van muskiete in hokke en 'n effektiewe ontsmettingsmetode wat in 'n Peet-Grady-toetskamer (PG-toetskamer) uitgevoer is. Ons het die doeltreffendheid van hierdie nuwe metode bekragtig deur populasies van insekdoderbestande en vatbare Aedes- en Anopheles-muskiete te gebruik. 'n Nuwe kenmerk van hierdie metode is die insluiting van 'n kamer wat op die muskiethokke gerig is, wat intydse kwantitatiewe assessering van muskietdoodsyfers na blootstelling aan insekdoders moontlik maak. Depper-ontsmetting verwyder effektief oorblywende piretroïedbevattende aërosololie van die toetskameroppervlak, met sterftesyfers van minder as 2% vir vatbare muskiete wat direk op die kameroppervlak getoets is. Geen ruimtelike heterogeniteit in doodmaak- of sterftesyfers onder muskiete in hokke is in die PG-kamer waargeneem nie. Ons dubbelhokmetode bied agt keer hoër deurset as die vryvlugmetode, wat gelyktydige toetsing van verskillende muskietstamme en effektiewe onderskeiding tussen vatbare en weerstandige muskietpopulasies wat parallel getoets word, moontlik maak.
Tot op hede is aërosol-insekdoders hoofsaaklik in die huis gebruik vir persoonlike beskerming, met beperkte gebruik in openbare gesondheidsprogramme. Onlangse studies het egter wydverspreide huishoudelike insekdodergebruik getoon in gebiede waar vektorgedraagde siektes algemeen voorkom. Of die motivering nou muskietafweermiddel of siektevoorkoming is, daar is 'n dringende behoefte aan gestandaardiseerde en maklik-om-te-gebruik metodes vir die sifting van endemiese muskietpopulasies vir vatbaarheid vir huishoudelike insekdoders. Dit is van kritieke belang om die doeltreffendheid van insekdoders teen plaaslike vektore te voorspel en te verstaan hoe die gebruik van huishoudelike insekdoders die evolusionêre seleksie vir insekdoderweerstand beïnvloed.
Aanvullende Metode 1 verskaf gedetailleerde stap-vir-stap instruksies vir die uitvoering van ons aërosol-insekdoder-toetsprogram.
Alhoewel WGO-riglyne die gebruik van outomatiese vernevelaars aanbeveel, verskaf hulle nie spesifieke tegniese spesifikasies nie. Die gebruik van outomatiese vernevelaars is van kardinale belang, aangesien handmatige verneveling in 'n propileenglikolkamer nie net arbeidsintensief is nie, maar ook ruimtelike teenstrydighede en variasies in vernevelingsduur kan veroorsaak.
Die reaksiekamer moet na elke toets gesteriliseer word, maar die interne skoonmaakmetode wat in die WGO-riglyn aanbeveel word, behels die toediening van water uit 'n slang. In ons daaglikse werk is hierdie metode die mees arbeidsintensiewe stap in die bedryf van bioanalitiese toerusting, daarom het ons 'n sterilisasieprosedure op basis van 'n depper ontwikkel en getoets.
Die verwyderbare dele van die waaier word behandel soos hierbo beskryf, en die lemme en raam van die waaier word skoongemaak met 'n spons wat in 'n 5%-oplossing van Decon 90 geweek is.
Gebaseer op die verband tussen spuitduur en produkleweringstempo, het ons aërosoldispenser ook goeie akkuraatheid getoon in die beheer van die aërosol dosisverhouding, ten minste oor die getoetste reeks van 1 tot 4 keer. Soos getoon in Fig. 3b, is hierdie eienskap veral belangrik vir die karakterisering van die dosis-respons verhouding van nuwe aërosolformulerings of die bepaling van die identifikasie dosis vir die opsporing van insekdoderweerstand.
Ons demonstreer dat ons hersiene protokol vir die evaluering van huishoudelike aërosol-insekdoders, met behulp van depper-ontsmetting, dubbelhokke, afstandbeheerde spuitmiddels en biometriese opnames vanaf aksiekameras, 'n meer effektiewe en haalbare alternatief vir huidige ... is.WHOaanbevelings. Die depper-ontsmettingsmetode, wat slegs 20 minute benodig, bespaar aansienlik tyd in vergelyking met die bestaande protokol (wat tipies een uur per toetskamer benodig). Dit verminder ook die tyd wat operateurs spandeer om volledige persoonlike beskermende toerusting aan te trek (bv. respiratoriese helms en antistatiese werksklere). Verder genereer hierdie metode minder besmette vloeistof en klere vir behandeling as 'n volledige skoonmaak van die toetskamer, waardeur die potensiaal vir kontaminasie van die kamer wat die toetskamer huisves, verminder word. Die depper-ontsmettingsmetode is ook geskik vir die ontsmetting van semi-permanente toetskamers watminimaalmeubelplasing in 'n verskeidenheid kameruitlegte.
'n Sleutelkwessie wat in hierdie studie en ander ondersoek is, is die standaardisering van blootstellingsdosisse van insekdoders wat in die omgewing oor verskillende toetsprotokolle toegedien word. Soos getoon in Figuur 2b, het die spuitvolume, ten spyte van 'n vaste spuitduur, gewissel tussen aërosolbliktipes, wat moontlik verskille in vervaardigingsprosesse weerspieël (bv. interne druk, dryfmiddelgebruik, spuitstukstruktuur, ens.). Verder beperk die huidige gebrek aan kommersieel beskikbare afstandbespuitingstoestelle met die vereiste buigsaamheid in spuitduur hul gebruik in die beoordeling van die dosis-respons-verhouding vir muskietbeheer. Handmatige bespuiting deur toetsluike of toegangsluike (indien beskikbaar) kan lei tot variasies in blootstellingsdosisse. Trouens, ons resultate beklemtoon die behoefte en belangrikheid daarvan om hierdie bronne van variasie te verminder. Vir weerstandige Aedes aegypti-populasies het ons 'n korrelasie waargeneem tussen die aërosoldosis en die finale bepaling van vatbaarheid of weerstand (Figuur 3b). Ideaal gesproke moet aërosoldosis gestandaardiseer word in gram aërosoliseerde stof eerder as in duur van aërosolisering om vergelykings tussen verskillende studies te vergemaklik.
RCAD bied 'n alternatiewe benadering vir toekomstige navorsing wat die impak van prosesvariasies verminder. Alhoewel ons gevind het dat standaardisering van aërosolspuitmiddels nie haalbaar is nie, het ons gedemonstreer dat die massa aërosol wat deur verskillende aërosolblikkies gelewer word, reproduceerbaar beraam kan word deur die spuitlengte te kalibreer (Figure 2b, 3a). Sodanige standaardisering van aërosolkonsentrasie in enige toetskamer is van kritieke belang om die reproduceerbaarheid van resultate te verbeter.
Gebaseer op ons ervaring en dié van ander navorsingsgroepe, hou die aanbevelings in die huidige Riglyn rakende die gebruik van aërosol-opsporingsmetodes vir die toets van vryvliegende muskiete beduidende logistieke uitdagings in vir laboratorium- en semi-veldstudies. Vryvliegende muskiet-opsporingsmetodes het byvoorbeeld baie lae deurset (insluitend arbeidsintensiewe hervang van oorlewende vryvliegende muskiete) en ly aan 'n aantal tegniese beperkings, soos probleme met die bepaling van doodmaaksyfers intyds.
Alhoewel ons gevalideerde dubbelhok-eksperiment die kwessie van vloeibeperkings aanspreek en 'n haalbare metode is vir die sifting van muskietvatbaarheid vir aërosol-insekdoders, moet daarop gelet word dat die sterftesyfers van Kaaimanseilande-muskiete aansienlik laer was in die hok-eksperiment as in die vryvlug-eksperiment (Fig. 5c, Tabel 1). Hierdie verskil kan 'n vermindering in die insekdoderdosis binne die hok weerspieël, aangesien minder aërosoldruppels die maas binnedring en die hok binnedring. Toekomstige studies kan groter maasstowwe en hokontwerpe met hoër waaierlugvloeitempo's (bv. silindriese ontwerpe) gebruik om die resultate wat met die verskillende eksperimentele metodes verkry is, verder te valideer.
Plasingstyd: 2 Februarie 2026